肉的宰后嫩化具体归因于肌原合成氯纶组成部分类型的损坏，肌原合成氯纶组成部分类型是由内源性淀粉酶水解反馈反馈酶溶解肌原合成氯纶和生殖上皮组织骨架淀粉酶会导致的。与两百多年来一直都在是注重重要的钙淀粉酶酶不一样，胱天淀粉酶酶（caspases）这两天拥有感好感一段话题。胱天淀粉酶酶在生殖上皮组织凋亡的施行环节起着关键所在的的效用，当中caspase-3在死了淀粉酶水解反馈反馈中的效用是各个面和比较复杂的，因而最该进的一步学习。S-亚硝基化经过也可以自动调结钙发出、精力新陈代谢、淀粉酶质溶解和生殖上皮组织凋亡来也可以自动调结吃起来，涉及嫩度和持水水平。企业早期学习表明S-亚硝基化也可以变动依赖感线粒体的caspase-3级联反馈，这可能会是腿部肌肉生殖上皮组织凋亡和鸡肉好品质发生变化的情况。caspase-3的学习重要是其与生殖上皮组织凋亡的社会关系，那么，都不有学习浅谈S-亚硝基化也可以自动调结caspase-3的新机制。

2024年9月由上海林果业大学时张万刚教学专业团体在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生物工程为该研究提供了亚硝基化表达组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

汉语问题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

刊物：Journal of Agricultural and Food Chemistry

202四年干扰分子：5.7

收录精力：2024年9月

买家公司的：南京农业大学

研究探讨材质：蛋白

拜谱给出技术性：亚硝基化修饰组学

技术设备途径：

一、研究探讨没想到

01.Caspase-3吸附性

现有尚不了解NO对caspase-3的克开发用有没归因于NO介导的S-亚硝基化，各个溶度等度的GSNO用作外源性NO厂家直销，以介导caspase-3的体内S-亚硝基化。的结果证明，与并没有GSNO的组不同之处，100、200和400μM GSNO组的caspase-3活性酶类酶偏态大幅度降底（图1），与事先通讯稿保持一致。GSNO清理大幅度降底caspase-3活性酶类酶的不确定原因仍有待于阐述。

图1 有差异 质量浓度的GSNO处理对caspase-3可溶性的影晌

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化的程度

实验探讨探讨Caspase-3的亚硝基化的方面，以阐发GSNO对Caspase-3的生理反应性。经GSNO除理后，检查到caspase-3蛋白质S-亚硝基化密度加入（图2）。一些因此证实，外源性GSNO培养计划可成功的英文引导caspase-3的离体S-亚硝基化。让人觉得大吃一惊的是，在就没有GSNO都存在的对比组中检查到有一个变弱的S-亚硝基化带，这证实caspase-3也许会发生内源性的S-亚硝基化。不仅，本实验探讨探讨中caspase-3的S-亚硝基化的方面较高，而caspase-3的活性氧减小，这与以后的实验探讨探讨不一样。因此，caspase-3的特男人S-亚硝基化绘制位点尚不清，还必须要 进步的研究。

图2 GSNO进行处理对caspase-3S-亚硝基化总体水平的影响力

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化表达组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的回文回文序列。暗蓝色标示图片的回文回文序列代表S-亚硝基化肽，朱红色标示图片的C代表S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱图

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3挥发结蛋白酶

结淀粉酶作为一个种核心的神经内部骨架淀粉酶，在维护肌神经内部组成部分的组成部分完成篇篇的性和做收缩性层面起着核心功效，调查S-亚硝基化caspase-3对结淀粉酶吸附的特别敏物质性具备有核心必要性。与Std（未用胱天淀粉酶酶-3和GSNO孵育的缺省肌合成纤维棉淀粉酶）组好于，0 μM GSNO组（肌原合成纤维棉和caspase-3的孵育，无GSNO）的完成篇篇的结淀粉酶的的量正相关减少，提升caspase-3对结淀粉酶具备有隐性的淀粉酶电离技能。在GSNO孵育后，完成篇篇的结淀粉酶的的的量清晰加剧（P < 0.05）。虽然，当GSNO量提升时，完成篇篇的结淀粉酶的的的量持续时间上涨（P < 0.05）（图5）。这一项出现是因为，SNO表达的caspase-3以层次信任的方案克制结淀粉酶的吸附。

图5.S-亚硝基化caspase-3溶解结血清

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3化学降解肌钙球蛋白-T

肌钙核蛋清-T (TnT)是原肌球核蛋清调整提供肌肉组织做收缩的细细的的须要肌原钎维核蛋清。TnT的生物挥发特殊性是查测到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化水平下，caspase-3对TnT的生物挥发时候图甲6已知，与Std组（包含caspase-3和GSNO的肌原钎维）相对比，caspase-3组中30 kDa TnT电影精彩片段更为明显的多，意味着caspase-3参加了TnT的生物挥发，显然，caspase-3与GSNO的孵育造成30 kDa TnT减低。在100和200 μM GSNO组相互之间沒有查测到明显的的相互影向(P > 0.05)，而当GSNO的有机废气浓度超过400 μM 时，该电影精彩片段更为明显的缩短(P < 0.05)。这种发现意味着了SNO掩盖的caspase-3对TnT生物挥发的控做成用。结核蛋清和TnT是caspase-3的明感底物，而GSNO外理减少caspase-3的特异性将造成肌原钎维核蛋清生物挥发水平减少。上述讲到所诉，NO诱骗的S-亚硝基化就可以实现掩盖半胱氨酸残基来调整caspase-3的特异性，从根本上进每一步影向其对结核蛋清和TnT的核蛋清电离作用，因而影向羊肉品格。

图6. S-亚硝基化caspase- 3化学降解肌钙蛋白质-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、个人总结

本研究分析有赖于浅谈S-亚硝基化对caspase-3遮盖的危害和随即对羊肉肌原钎维棉休外吸附的危害。核核蛋白酶S-亚硝基化都可以遮盖caspase-3的半胱氨酸残基，以此会造成caspase-3抗逆性减轻，进一部压制了其对羊肉肌原钎维棉核核蛋白酶的核核蛋白酶淀粉水解性能。

三、拜谱个人心得体会

调查所采用了酶活测量，亚硝基化呈现组学分析一下，WB等测试伎俩，发展球淀粉酶酶质S-亚硝基化需要呈现caspase-3的半胱氨酸残基，这会导致了caspase-3活性酶类的消减，相结这一步可以抑制了其对鸡肉肌原纤维棉球淀粉酶酶质的球淀粉酶酶质溶解程度。本调查为释疑球淀粉酶酶质质亚硝基化对肉质地的改善规则提供数据了个新的第三视角。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的营养素酶质组学、修饰语营养素酶质组学、排泄组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸系列物料物料，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺酸性反应、total脱色还原系统、游走巯基，欢迎大家咨询！

参阅资料：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663